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Human DNA extraction from highly degraded skeletal remains: How to find a suitable method?

DNA提取 色谱法 牙骨质 萃取(化学) DNA断裂 DNA 化学 材料科学 聚合酶链反应 生物化学 牙本质 细胞凋亡 程序性细胞死亡 复合材料 基因
作者
Diana C. Vinueza‐Espinosa,Cristina Santos,Cristina Martínez‐Labarga,Assumpció Malgosa Morera
出处
期刊:Electrophoresis [Wiley]
卷期号:41 (24): 2149-2158 被引量:13
标识
DOI:10.1002/elps.202000171
摘要

Abstract Retrieving DNA from highly degraded human skeletal remains is still a challenge due to low concentration and fragmentation, which makes it difficult to extract and purify. Recent works showed that silica‐based methods allow better DNA recovery and this fact may be attributed to the type of bones and the quality of the preserved tissue. However, more systematic studies are needed to evaluate the efficiency of the different silica‐based extraction methods considering the type of bones. The main goal of the present study is to establish the best extraction method and the type of bone that can maximize the recovery of PCR‐amplifiable DNA and the subsequent retrieval of mitochondrial and nuclear genetic information. Five individuals were selected from an archaeological site located in Catalonia–Spain dating from 5th to 11th centuries AD. For each individual, five samples from different skeletal regions were collected: petrous bone, pulp cavity and cementum of tooth, and rib and limb bones. Four extraction methods were tested, three silica‐based (silica in‐suspension, HE column and XS plasma column) and the classical method based on phenol–chloroform. Silica in‐suspension method from petrous bone and pulp cavity showed the best results. However, the remains preservation will ultimately be the key to the molecular result success.

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