Comparison of a TaqMan real-time polymerase chain reaction assay with a loop-mediated isothermal amplification assay for detection of Gallid herpesvirus 1

生物 逆转录聚合酶链式反应 底漆(化妆品) 放大器 套式聚合酶链反应 连续稀释 病毒 DNA
作者
Shan-Chia Ou,Joseph J. Giambrone,Kenneth S. Macklin
出处
期刊:Journal of Veterinary Diagnostic Investigation [SAGE]
卷期号:24 (1): 138-141 被引量:11
标识
DOI:10.1177/1040638711427578
摘要

A TaqMan real-time polymerase chain reaction (PCR) and loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay were developed to detect Gallid herpesvirus 1 (GaHV-1, formerly Infectious laryngotracheitis virus). The standard curve of real-time PCR was established, and the sensitivity reached 10 copies/μl. In the current study, the conversion between viral titer and GaHV-1 genomic copy number was constructed. Six primers for LAMP assay amplified target gene at 65°C within 45 min, and the detection limit was 60 copies/μl. The 6 primers were highly specific, sensitive, and reproducible for detection of GaHV-1. Although the sensitivity of LAMP was lower than that of real-time PCR, LAMP was faster, less expensive, and did not require a thermocycler. The LAMP assay would be a viable alternative assay in diagnostic laboratories that do not employ real-time PCR technology.
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