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m6A methyltransferase AflIme4 orchestrates mycelial growth, development and aflatoxin B1 biosynthesis in Aspergillus flavus

黄曲霉 生物 黄曲霉毒素 甲基化 甲基转移酶 生物合成 生物化学 分子生物学 基因 微生物学 食品科学
作者
Liuke Liang,Sheng Wang,Shan Wei,Lei Yang,Shuaibing Zhang,Huan-Chen Zhai,Yuansen Hu,Yangyong Lv
出处
期刊:Microbiological Research [Elsevier]
卷期号:283: 127710-127710
标识
DOI:10.1016/j.micres.2024.127710
摘要

Aflatoxin B1 (AFB1), a highly toxic secondary metabolite produced by Aspergillus flavus, poses a severe threat to agricultural production, food safety and human health. The methylation of mRNA m6A has been identified as a regulator of both the growth and AFB1 production of A. flavus. However, its intracellular occurrence and function needs to be elucidated. Here, we identified and characterized a m6A methyltransferase, AflIme4, in A. flavus. The enzyme was localized in the cytoplasm, and knockout of AflIme4 significantly reduced the methylation modification level of mRNA. Compared with the control strains, ΔAflIme4 exhibited diminished growth, conidial formation, mycelial hydrophobicity, sclerotium yield, pathogenicity and increased sensitivity to CR, SDS, NaCl and H2O2. Notably, AFB1 production was markedly inhibited in the A. flavus ΔAflIme4 strain. RNA-Seq coupled with RT-qPCR validation showed that the transcriptional levels of genes involved in the AFB1 biosynthesis pathway including aflA, aflG, aflH, aflK, aflL, aflO, aflS, aflV and aflY were significantly upregulated. Methylated RNA immunoprecipitation-qPCR (MeRIP-qPCR) analysis demonstrated a significant increase in m6A methylation modification levels of these pathway-specific genes, concomitant with a decrease in mRNA stability. These results suggest that AflIme4 attenuates the mRNA stability of genes in AFB1 biosynthesis by enhancing their mRNA m6A methylation modification, leading to impaired AFB1 biosynthesis. Our study identifies a novel m6A methyltransferase AflIme4 and highlights it as a potential target to control A. flavus growth, development and aflatoxin pollution.
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