Viability Determination of Helicobacter pylori Using Propidium Monoazide Quantitative PCR

单叠氮丙二钠 生物 碘化丙啶 微生物学 实时聚合酶链反应 细胞凋亡 生物化学 基因 程序性细胞死亡
作者
Gemma Agustí,Francesc Codony,Mariana Fittipaldi,Bárbara Adrados,Jordi Morató
出处
期刊:Helicobacter [Wiley]
卷期号:15 (5): 473-476 被引量:41
标识
DOI:10.1111/j.1523-5378.2010.00794.x
摘要

Abstract Background: While Helicobacter pylori exists in a bacillary form in both the natural habitat and the human host, detrimental environmental circumstances have been observed to lead to the conversion of H. pylori from the bacillary to the coccoid form. However, the viability or nonviability of coccoid forms remains to be established in H. pylori . The aim of this study was to determine whether the quantitative PCR combined with propidium monoazide could be an alternative and good technique to determine H. pylori viability in environmental samples and, to contribute to understanding of the role of the H. pylori forms. Materials and Methods: Viability, morphological distribution, and the number of live H. pylori cells were determined using a propidium monoazide‐based quantitative PCR method, at various time points. Results: Under adverse environmental conditions was observed the conversion of H. pylori from the bacillary to the coccoid form, and the decrease in amplification signal, in samples that were treated with propidium monoazide, over the time. Conclusions: Incorporation of propidium monoazide indicates that there is an increase in H. pylori cells with the damaged membrane over the study, leading to the manifestation of cellular degeneration and death. Consequently, quantitative PCR combined with propidium monoazide contributes to our understanding of the role of H. pylori cells, under adverse environmental conditions.
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