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Comparing the performance of conventional PCR, RTQ-PCR, and droplet digital PCR assays in detection of Shigella

生物 数字聚合酶链反应 志贺氏菌 实时聚合酶链反应 多重聚合酶链反应 聚合酶链反应 计算生物学 分子生物学 病毒学 微生物学 底漆(化妆品) 放大器 DNA DNA提取 塔克曼 遗传学 沙门氏菌 细菌 基因
作者
Jin Yang,Nana Zhang,Jun Lv,Ping Zhu,Xing Pan,Jiaqingzi Hu,Wenfeng Wu,Shan Li,Hongtao Li
出处
期刊:Molecular and Cellular Probes [Elsevier BV]
卷期号:51: 101531-101531 被引量:15
标识
DOI:10.1016/j.mcp.2020.101531
摘要

Abstract The incidence of foodborne infections caused by Shigella spp. is still very high in every year, which poses a great potential threat to public health. Conventional quantification methods based on culture techniques, biochemical, and serological identification are time-consuming and labor-intensive. To develop a more rapid and efficient detection method of Shigella spp., we compared the sensitivity and specificity of three different polymerase chain reaction (PCR) methods, including conventional PCR, quantitative real-time PCR (RTQ-PCR), and droplet digital PCR (ddPCR). Our results indicated that ddPCR method exhibited higher sensitivity, and the limit of detection was 10−5 ng/μl for genomic DNA templates, 10−1 cfu/ml for Shigella bacteria culture. In addition, we found that ddPCR was a time-saving method, which required a shorter pre-culturing time. Collectively, ddPCR assay was a reliable method for rapid and effective detection of Shigella spp.

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