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Strategies for immunophenotyping and purifying classical Hodgkin lymphoma cells from lymph nodes by flow cytometry and flow cytometric cell sorting

免疫分型 流式细胞术 淋巴瘤 细胞仪 单元格排序 T细胞 生物 病理 分子生物学 免疫学 医学 免疫系统
作者
Jonathan R. Fromm,Brent L. Wood
出处
期刊:Methods [Elsevier]
卷期号:57 (3): 368-375 被引量:21
标识
DOI:10.1016/j.ymeth.2012.03.028
摘要

Flow cytometry is an established technique to immunophenotype hematopoietic neoplasms. While the diagnosis of classical Hodgkin lymphoma (CHL) has commonly been made using paraffin sections, we have recently demonstrated that the neoplastic Hodgkin and Reed–Sternberg (HRS) cells of CHL can be identified by flow cytometry. Using 6- and 9-color flow cytometric assays, CHL can be immunophenotyped with 85–90% sensitivity and nearly 100% specificity. Analysis of this data requires using established gating strategies to help in the identification of putative HRS cell populations. Interestingly, HRS cells bind to reactive T cells (HRS–T cell rosetting) and this phenomenon can be identified and utilized diagnostically by flow cytometry. In addition, the reactive T cells of CHL show characteristic immunophenotypic changes by flow cytometry and these changes can suggest a diagnosis of CHL. Finally, these principles can be employed to rapidly purify HRS cells using flow cytometric cell sorting. This manuscript provides experimental protocols for immunophenotyping CHL by flow cytometry as well as purifying the HRS cells via flow cytometric cell sorting.
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