清晨好,您是今天最早来到科研通的研友!由于当前在线用户较少,发布求助请尽量完整的填写文献信息,科研通机器人24小时在线,伴您科研之路漫漫前行!

Measurement of α-synuclein as protein cargo in plasma extracellular vesicles

细胞外小泡 化学 突触核蛋白 磷酸化 外体 α-突触核蛋白 细胞生物学 微泡 生物化学 生物 医学 帕金森病 小RNA 病理 基因 疾病
作者
Tal Gilboa,Dmitry Ter‐Ovanesyan,Shih‐Chin Wang,Sara Whiteman,George T. Kannarkat,George M. Church,Alice Chen‐Plotkin,David R. Walt
出处
期刊:Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America [National Academy of Sciences]
卷期号:121 (45)
标识
DOI:10.1073/pnas.2408949121
摘要

Extracellular vesicles (EVs) are released by all cells and hold great promise as a class of biomarkers. This promise has led to increased interest in measuring EV proteins from both total EVs as well as brain-derived EVs in plasma. However, measuring cargo proteins in EVs has been challenging because EVs are present at low levels, and EV isolation methods are imperfect at separating EVs from free proteins. Thus, knowing whether a protein measured after EV isolation is truly inside EVs is difficult. In this study, we developed methods to measure whether a protein is inside EVs and quantify the ratio of a protein in EVs relative to total plasma. To achieve this, we combined a high-yield size-exclusion chromatography protocol with an optimized protease protection assay and Single Molecule Array (Simoa) digital enzyme-linked immunoassays (ELISAs) for ultrasensitive measurement of proteins inside EVs. We applied these methods to analyze α-synuclein and confirmed that a small fraction of the total plasma α-synuclein is inside EVs. Additionally, we developed a highly sensitive Simoa assay for phosphorylated α-synuclein (phosphorylated at the Ser129 residue). We found enrichment in the phosphorylated α-synuclein to total α-synuclein ratio inside EVs relative to outside EVs. Finally, we applied the methods we developed to measure total and phosphorylated α-synuclein inside EVs from Parkinson’s disease and Lewy body dementia patient samples. This work provides a framework for determining the levels of proteins in EVs and represents an important step in the development of EV diagnostics for diseases of the brain, as well as other organs.
最长约 10秒,即可获得该文献文件

科研通智能强力驱动
Strongly Powered by AbleSci AI
科研通是完全免费的文献互助平台,具备全网最快的应助速度,最高的求助完成率。 对每一个文献求助,科研通都将尽心尽力,给求助人一个满意的交代。
实时播报
和谐的夏岚完成签到 ,获得积分10
3秒前
量子星尘发布了新的文献求助10
4秒前
雪山飞龙发布了新的文献求助10
9秒前
量子星尘发布了新的文献求助10
17秒前
量子星尘发布了新的文献求助10
33秒前
Benhnhk21完成签到,获得积分10
39秒前
49秒前
量子星尘发布了新的文献求助10
50秒前
51秒前
1分钟前
量子星尘发布了新的文献求助10
1分钟前
eurhfe发布了新的文献求助10
1分钟前
木子草甜完成签到,获得积分10
1分钟前
qianchimo完成签到 ,获得积分10
1分钟前
Ting完成签到,获得积分10
1分钟前
量子星尘发布了新的文献求助10
1分钟前
跳跃的鹏飞完成签到 ,获得积分10
1分钟前
量子星尘发布了新的文献求助10
1分钟前
量子星尘发布了新的文献求助10
1分钟前
1分钟前
eurhfe完成签到,获得积分10
2分钟前
量子星尘发布了新的文献求助10
2分钟前
2分钟前
2分钟前
雪山飞龙发布了新的文献求助10
2分钟前
小丁完成签到,获得积分10
2分钟前
量子星尘发布了新的文献求助10
2分钟前
找文献的天才狗完成签到,获得积分10
2分钟前
2分钟前
2分钟前
HHW完成签到 ,获得积分10
2分钟前
量子星尘发布了新的文献求助10
2分钟前
胖小羊完成签到 ,获得积分10
2分钟前
量子星尘发布了新的文献求助10
2分钟前
2分钟前
2分钟前
k sir发布了新的文献求助10
2分钟前
量子星尘发布了新的文献求助10
3分钟前
量子星尘发布了新的文献求助10
3分钟前
量子星尘发布了新的文献求助50
3分钟前
高分求助中
Production Logging: Theoretical and Interpretive Elements 2700
Neuromuscular and Electrodiagnostic Medicine Board Review 1000
Statistical Methods for the Social Sciences, Global Edition, 6th edition 600
こんなに痛いのにどうして「なんでもない」と医者にいわれてしまうのでしょうか 510
ALUMINUM STANDARDS AND DATA 500
Walter Gilbert: Selected Works 500
岡本唐貴自伝的回想画集 500
热门求助领域 (近24小时)
化学 材料科学 医学 生物 工程类 有机化学 物理 生物化学 纳米技术 计算机科学 化学工程 内科学 复合材料 物理化学 电极 遗传学 量子力学 基因 冶金 催化作用
热门帖子
关注 科研通微信公众号,转发送积分 3666414
求助须知:如何正确求助?哪些是违规求助? 3225446
关于积分的说明 9763022
捐赠科研通 2935282
什么是DOI,文献DOI怎么找? 1607589
邀请新用户注册赠送积分活动 759266
科研通“疑难数据库(出版商)”最低求助积分说明 735188