Structural basis for recognition of the FLAG-tag by anti-FLAG M2

标志(线性代数) 标志标签 化学 结合 数学 生物化学 基因 重组DNA 域代数上的 纯数学 数学分析 融合蛋白
作者
J. Wouter Beugelink,Els Sweep,B.J.C. Janssen,Joost Snijder,Matti F. Pronker
出处
期刊:Journal of Molecular Biology [Elsevier]
卷期号:436 (16): 168649-168649
标识
DOI:10.1016/j.jmb.2024.168649
摘要

The FLAG-tag/anti-FLAG system is a widely used biochemical tool for protein detection and purification. Anti-FLAG M2 is the most popular antibody against the FLAG-tag, due to its ease of use, versatility, and availability in pure form or as bead conjugate. M2 binds N-terminal, C-terminal and internal FLAG-tags and binding is calcium-independent, but the molecular basis for the FLAG-tag specificity and recognition remains unresolved. Here we present an atomic resolution (1.17 Å) structure of the FLAG peptide in complex with the Fab of anti-FLAG M2, revealing key binding determinants. Five of the eight FLAG peptide residues form direct interactions with paratope residues. The FLAG peptide adopts a 310 helix conformation in complex with the Fab. These structural insights allowed us to rationally introduce point mutations on both the peptide and antibody side. We tested these by surface plasmon resonance, leading us to propose a shorter yet equally binding version of the FLAG-tag for the M2 antibody.
最长约 10秒,即可获得该文献文件

科研通智能强力驱动
Strongly Powered by AbleSci AI
更新
大幅提高文件上传限制,最高150M (2024-4-1)

科研通是完全免费的文献互助平台,具备全网最快的应助速度,最高的求助完成率。 对每一个文献求助,科研通都将尽心尽力,给求助人一个满意的交代。
实时播报
lianliyou发布了新的文献求助10
刚刚
1秒前
FartKing发布了新的文献求助30
2秒前
小二郎应助松本润不足采纳,获得10
4秒前
丘比特应助noobmaster采纳,获得10
5秒前
7秒前
9秒前
30完成签到,获得积分10
11秒前
12秒前
13秒前
华仔应助pica采纳,获得10
13秒前
30发布了新的文献求助30
14秒前
CodeCraft应助L112233采纳,获得10
16秒前
16秒前
ff完成签到 ,获得积分10
17秒前
19秒前
20秒前
22秒前
科研的苦发布了新的文献求助10
22秒前
24秒前
xjh发布了新的文献求助20
24秒前
Xman发布了新的文献求助30
24秒前
怂mi完成签到,获得积分10
25秒前
double ting发布了新的文献求助10
28秒前
29秒前
30秒前
32秒前
33秒前
35秒前
35秒前
36秒前
Cynthia完成签到 ,获得积分10
37秒前
38秒前
Hesm发布了新的文献求助10
38秒前
39秒前
酷波er应助科研通管家采纳,获得10
39秒前
烟花应助科研通管家采纳,获得10
40秒前
所所应助科研通管家采纳,获得10
40秒前
Orange应助科研通管家采纳,获得10
40秒前
夏筱应助科研通管家采纳,获得10
40秒前
高分求助中
Licensing Deals in Pharmaceuticals 2019-2024 3000
Cognitive Paradigms in Knowledge Organisation 2000
Effect of reactor temperature on FCC yield 2000
How Maoism Was Made: Reconstructing China, 1949-1965 800
Introduction to Spectroscopic Ellipsometry of Thin Film Materials Instrumentation, Data Analysis, and Applications 600
Promoting women's entrepreneurship in developing countries: the case of the world's largest women-owned community-based enterprise 500
Shining Light on the Dark Side of Personality 400
热门求助领域 (近24小时)
化学 医学 生物 材料科学 工程类 有机化学 生物化学 物理 内科学 纳米技术 计算机科学 化学工程 复合材料 基因 遗传学 催化作用 物理化学 免疫学 量子力学 细胞生物学
热门帖子
关注 科研通微信公众号,转发送积分 3309791
求助须知:如何正确求助?哪些是违规求助? 2943034
关于积分的说明 8512084
捐赠科研通 2618067
什么是DOI,文献DOI怎么找? 1430810
科研通“疑难数据库(出版商)”最低求助积分说明 664324
邀请新用户注册赠送积分活动 649469