Effect of luteinized granulosa cell conditioned medium on cortical granule of mouse oocytes matured in vitro

目的 探讨人卵巢黄素化颗粒细胞生长液对体外成熟小鼠卵母细胞皮质颗粒分布的影响.方法将635个小鼠未成熟卵母细胞随机分为对照组(351个未成熟卵母细胞)和实验组(284个未成熟卵母细胞).实验组在培养基中加入50%人卵巢黄素化颗粒细胞生长液、卵泡刺激素(终浓度为75 U/L),和雌二醇(终浓度为1 nmol/L);对照组不加人卵巢黄素化颗粒细胞生长液,其余同实验组.每组分别于体外培养16 h和18 h,对细胞核成熟的卵母细胞进行体外受精,采用直接免疫荧光标记法,用异硫酸酯荧光素-扁豆凝集素标记卵母细胞皮质颗粒,在激光扫描共聚焦显微镜下观察皮质颗粒的分布.结果两组细胞核成熟的卵母细胞共126个.卵母细胞细胞核成熟率,对照组培养16 h为70.0%,培养18 h为75.1%;实验组培养16 h为76.5%,培养18 h为83.1%,两组比较,差异无显著性(P>0.05).两组培养16 h的成熟卵母细胞的体外受精均失败,培养18 h后成熟卵母细胞均出现受精及胚胎发育.两组卵母细胞皮质颗粒呈皮质分布型(即卵母细胞成熟的特征)的比例,对照组培养16 h为10.0%,培养18 h为57.1%;实验组培养16 h为50.0%,培养18 h为91.6%;每组培养18 h的皮质颗粒呈皮质分布型的比例均高于培养16 h者(P<0.001),实验组培养18 h的皮质颗粒呈皮质分布型的比例高于对照组(P<0.05).结论人卵巢黄素化颗粒细胞生长液可通过提高小鼠卵母细胞皮质颗粒呈皮质分布型的比例,改善体外成熟卵母细胞的细胞质成熟。