LC-MS/MS法研究Cocktail探针药物咖啡因、右美沙芬、奥美拉唑、咪达唑仑及其代谢产物在大鼠血浆中的药代动力学

目的建立灵敏、快速、稳定的测定大鼠血浆中CYP450探针药物/代谢产物，咖啡因/副黄嘌呤、奥美拉唑/5-羟基奥美拉唑、右美沙芬/右啡烷、咪达唑仑/1′-羟基咪达唑仑的LC-MS/MS方法，并用于其在大鼠体内的药代动力学研究。 方法100 μL血浆样品加入内标地西泮及乙酸铵溶液，乙酸乙酯进行液液萃取，离心取上清挥干复溶，LC-MS/MS检测。选用Agilent Eclipse Plus-C18色谱柱(50 mm×2.1 mm, 3.5 μm)，乙腈和0.01%甲酸(1 mmol·L-1甲酸铵) 作为流动相，梯度洗脱，流速为0.3 mL·min-1，进样量10 μL。采用电喷雾电离源(ESI)，扫描方式为多反应正离子监测模式(MRM+)，咖啡因m/z：195.0/138.1；副黄嘌呤m/z：181.1/124.1；奥美拉唑m/z：346.1/198.1；5-羟基奥美拉唑m/z：362.1/214.1；右美沙芬m/z：272.2/147.1；右啡烷m/z：258.1/157.1；咪达唑仑m/z：326.1/291.1；1′-羟基咪达唑仑m/z：342.1/324.1；内标地西泮m/z：285.1/154.0。 结果咖啡因、副黄嘌呤、奥美拉唑、5-羟基奥美拉唑、右美沙芬、右啡烷、咪达唑仑和1′-羟基咪达唑仑的线性范围分别为1.95~2 000、0.98~250、0.48~2 000、0.98~250、0.98~2 000、0.48~125、1.95~2 000和1.95~250 μg·L-1。RSD < 15%且无基质效应。 结论该方法快速、灵敏、重现性好，可用于血浆中上述探针药物/代谢产物浓度的测定，便于深入进行代谢酶CYP1A2、CYP2C19、CYP2D6和CYP3A4的代谢相关研究。