Identification of major and minor chicken allergens in dogs

Allergens targeted by serum-specific immunoglobulin E (sIgE) in dogs clinically allergic to chicken have not been reported.To characterise the allergens targeted by sIgE in dogs sensitised and allergic to chicken.Sera from three dogs not sensitised to chicken, from 10 chicken sensitised dogs and from 12 chicken allergic dogs.Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) and immunoblotting with a commercial chicken extract were utilized. The bands identified on immunoblotting were sequenced by mass spectrometry for allergen characterization.Using ELISA, we detected chicken-sIgE above the positive threshold in zero of three (0%) nonsensitised dogs, five of five (100%) chicken-sensitised dogs (a selection criterion), and in seven of 12 (58%) chicken-allergic dogs. Immunoblotting performed with the same extract revealed IgE-bound protein bands in 100% of all chicken-sensitised and -allergic dogs, respectively. To identify the allergens, we excised the corresponding bands on the electrophoretic gel, and submitted them for sequencing by mass spectrometry. We conclusively identified seven major allergens (serum albumin, pyruvate kinase M, enolase 3, creatine kinase M, lactate dehydrogenase A, glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase and triose-phosphate isomerase) and one minor allergen (troponin C), which are relevant to dogs.We identified herein seven major chicken allergens for dogs, several of which are known to be cross-reactive allergens for humans. Based on their degree of sequence identity, these allergens exhibit the theoretical potential to be cross-reactive between poultry and mammalian meats; six of these allergens already are known to be cross-reactive between chicken and fish species. Future studies should address the clinical relevance and cross-reactivity potential of these chicken allergens in dogs.Allergene, die durch Serum-spezifisches Immunglobulin E (sIgE) bei Hunden gefunden werden, die klinisch allergisch auf Hühner reagieren, wurden noch nicht beschrieben.Eine Charakterisierung der Allergene, auf die sIgE bei Hunden, die allergisch auf Hühner reagieren, abzielen.Drei Sera von Hunden, die nicht auf Hühner sensibilisiert waren, 10 Sera von Hunden, die auf Hühner sensibilisiert waren und 12 Sera von Hühner-allergischen Hunden.Enzym-linked Immunosorbent Assay (ELISA) und Immunblotting mit einem kommerziellen Hühnerextrakt wurden eingesetzt. Die Banden, die mittels Immunblot identifiziert worden waren, wurden mittels Massenspektrometrie zur Allergencharakterisierung sequenziert.Mittels ELISA wurden Hühner-sIgE oberhalb des positiven Grenzwerts bei null von drei (0%) nichtsensibilisierten Hunden, bei fünf von fünf (100%) der Hühner-sensibilisierten Hunde (ein Selektionskriterium), und bei sieben von 12 (58%) der Hühner-allergischen Hunde gefunden. Immunblots, die mit demselben Extrakt durchgeführt wurden, zeigten IgE-gebundene Proteinbanden bei 100% aller Hühner-sensibilisierten bzw - allergischen Hunde. Um die Allergene zu identifizieren, wurden die korrespondierenden Banden auf dem elektrophoretischen Gel herausgeschnitten und zur Sequenzierung mittels Massenspektrometrie übermittelt. Es wurden eindeutig sieben Hauptallergene identifiziert (Serumalbumin, Pyrovatkinase M, Enolase 3, Kreatinkinase M, Laktatdehydrogenase A, Glyceraldehyd-3-Phosphatdehydrogenase und Triose-Phosphat Isomerase) und ein Nebenallergen (Troponin C), welche für Hunde relevant sind.Es wurden in dieser Studie sieben Haupt (major) Hühnerallergene für Hunde gefunden, wobei bei einigen bekannt ist, dass sie kreuz-reaktive Allergene für den Menschen darstellen. Basierend auf dem Ausmaß ihrer Sequenzidentität, besitzen diese Allergene das theoretische Potential zwischen Geflügel- und Säugerfleisch kreuz-reaktiv zu sein; sechs dieser Allergene sind bereits als kreuz-reaktiv zwischen Huhn und Fisch Spezies bekannt. Zukünftige Studien sollten die klinische Relevanz und das Potential der Kreuz-Reaktivität dieser Hühnerallergene bei Hunden evaluieren.Alle Autoren haben finanzielle Unterstützung von Royal Canin erhalten, entweder für Beratungen (TO), Vorträge (TO und UM) oder Forschungsprojekte (TO, CMPH, UM, KB und JB).背景-临床上对鸡肉过敏的犬血清中的特异性免疫球蛋白E(sIgE)靶向过敏原尚未见报道。 目的-研究鸡肉致敏和过敏犬的sIgE靶向过敏原表征 动物- 3份未对鸡肉致敏的犬血清、10份鸡肉致敏犬血清和12份鸡肉过敏犬血清。 方法和材料-使用酶联免疫吸附试验(ELISA)和市售鸡肉提取物的免疫印迹法。通过质谱法对免疫印迹法鉴别的条带进行测序, 描述过敏原表征。 结果-使用ELISA, 我们在3只(0%)未致敏犬种的零只、5只(100%)鸡肉致敏犬 (选择标准) 中的5只和12只鸡肉过敏犬中的7只(58%)中检测到高于阳性阈值的鸡肉-sIgE。用相同提取物进行免疫印迹, 发现所有鸡肉致敏和过敏犬中分别有100%出现IgE结合蛋白条带。为了鉴定过敏原, 我们切下了电泳凝胶上的相应条带, 并提交它们进行质谱测序。我们最终确定了与犬相关的7种主要过敏原 (血清白蛋白、丙酮酸激酶M、烯醇化酶3、肌酸激酶M、乳酸脱氢酶A、甘油醛-3-磷酸脱氢酶和磷酸丙糖异构酶) 和1种次要过敏原 (肌钙蛋白C) 。 结论和临床相关性-我们在此确定了犬的7种主要鸡肉过敏原, 其中几种已知是人类的交叉反应性过敏原。根据其序列同一性程度, 这些过敏原在家禽和哺乳动物肉类之间, 表现出交叉反应的理论可能性; 已知其中6种过敏原在鸡肉和鱼类之间具有交叉反应性。未来的研究应阐述这些鸡肉过敏原在犬中的临床相关性和交叉反应可能性。 利益冲突: 所有作者均获得Royal Canin的资助, 用于咨询(TO)、讲座 (TO和UM) 或研究项目 (TO、CMPH、UM、KB和JB) 。.Les allergènes ciblés par l'immunoglobuline E spécifique sérique (sIgE) chez les chiens cliniquement allergiques au poulet n'ont pas été décrits.Caractériser les allergènes ciblés par les sIgE chez les chiens sensibilisés et allergiques au poulet ANIMAUX: Trois sera de chiens non sensibilisés au poulet, 10 sera de chiens sensibilisés au poulet et 12 sera de chiens allergiques au poulet. MÉTHODES ET MATÉRIEL: Un dosage immuno-enzymatique (ELISA) et un immunoblot avec un extrait de poulet du commerce ont été utilisés. Les bandes identifiées sur immunoblot ont été séquencées par spectrométrie de masse pour la caractérisation des allergènes. RÉSULTATS: À l'aide d'ELISA, nous avons détecté des IgE de poulet au-dessus du seuil positif chez zéro des trois (0 %) chiens non sensibilisés, cinq des cinq (100 %) chiens sensibilisés au poulet (un critère de sélection) et chez sept des 12 (58 %) chiens allergiques au poulet. L'immunoblot réalisé avec le même extrait a révélé des bandes de protéines liées aux IgE chez 100 %, respectivement de tous les chiens sensibilisés au poulet et allergiques. Pour identifier les allergènes, nous avons excisé les bandes correspondantes sur le gel électrophorétique, et les avons soumises au séquençage par spectrométrie de masse. Nous avons identifié de manière concluante sept allergènes majeurs (sérum albumine, pyruvate kinase M, énolase 3, créatine kinase M, lactate déshydrogénase A, glycéraldéhyde-3-phosphate déshydrogénase et triose-phosphate isomérase) et un allergène mineur (troponine C), qui sont pertinents pour chiens.Nous avons identifié ici sept allergènes majeurs de poulet pour les chiens, dont plusieurs sont connus pour être des allergènes à réaction croisée pour l'homme. Sur la base de leur degré d'identité de séquence, ces allergènes présentent le potentiel théorique d'une réaction croisée entre les viandes de volaille et de mammifères ; six de ces allergènes sont déjà connus pour leur réaction croisée entre les espèces de poulet et de poisson. Les futures études devraient porter sur la pertinence clinique et le potentiel de réactivité croisée de ces allergènes de poulet chez le chien. CONFLITS D'INTÉRÊTS: Tous les auteurs ont reçu un soutien financier de Royal Canin pour des projets de conseil (TO), de cours (TO et UM) ou de recherche (TO, CMPH, UM, KB et JB).背景 - 鶏肉に対して臨床的にアレルギーのある犬において、血清特異的免疫グロブリンE(sIgE) が標的とするアレルゲンは報告されていない。 目的 - 本研究の目的は、鶏肉に感作およびアレルギーのある犬におけるsIgEが標的とするアレルゲンの特徴を明らかにすることであった。 供試動物 - 鶏肉に感作されていない犬からの3つの血清、鶏肉に感作された犬からの10の血清、鶏肉アレルギーの犬からの12の血清。 材料と方法 - 市販の鶏肉抽出物を用いた酵素結合免疫吸着法 (ELISA)及びイムノブロッティング法を利用した。イムノブロッティング法で同定されたバンドは、アレルゲンの特徴付けのために質量解析で配列された。 結果-ELISAを用いて、非感作犬3頭中0頭 (0%) 、鶏肉感作犬5頭中5頭 (100%) (選択基準) 、鶏肉アレルギー犬12頭中7頭 (58%) で、陽性の閾値を超える鶏肉IgEを検出した。また、同じ抽出液を用いたイムノブロッティング法では、鶏肉に感作された犬及びアレルギーのある犬のそれぞれ100%にIgE結合タンパク質バンドが認められた。アレルゲンを同定するために、電気泳動ゲル上の対応するバンドを切り取り、質量解析による塩基配列の決定に供した。その結果、犬に関連する7つの主要アレルゲン (血清アルブミン、ピルビン酸キナーゼM、エノラーゼ3、クレアチンキナーゼM、乳酸デヒドロゲナーゼA、グリセルアルデヒド-3-リン酸デヒドロゲナーゼ、トリオースリン酸イソメラーゼ) 及び1つのマイナーアレルゲン (トロポニンC) を決定的に同定した。 結論と臨床的妥当性 - 我々はここに、イヌにとっての7つの主要な鶏肉アレルゲンを同定したが、そのうちのいくつかはヒトにとっての交差反応性アレルゲンであることが知られている。これらのアレルゲンは、その配列同一性の程度から、鶏肉及び哺乳類の肉間で理論的に交差反応性を示す可能性がある。これらのアレルゲンのうち6つは、すでに鶏肉及び魚類間で交差反応性を示すことが知られている。今後の研究では、イヌにおけるこれらの鶏肉アレルゲンの臨床的妥当性及び交差反応性の可能性を検討する必要がある。 利害の衝突 すべての著者は、コンサルティング (TO) 、講演 (TOおよびUM) 、または研究プロジェクト (TO、CMPH、UM、KBおよびJB) のいずれかについて、Royal Canin社から経済的支援を受けている。.Os alérgenos alvo das imunoglobulinas E específicas séricas (sIgE) em cães clinicamente alérgicos a frango ainda não foram relatados.Caracterizar os alérgenos alvo das sIgE em cães sensibilizados e alérgicos a frango.Três soros de cães não sensibilizados a frango, 10 soros de cães sensibilizados a frango e 12 soros de cães alérgicos a frango. MÉTODOS E MATERIAIS: Ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA) e immunoblotting com um extrato de frango comercial foram utilizados. As bandas identificadas no immunoblotting foram sequenciadas por espectrometria de massa para caracterização do alérgeno.Utilizando o ELISA, detectamos sIgE de frango acima do limite de referência para positividade em zero de três (0%) cães não sensibilizados, cinco de cinco (100%) cães sensibilizados a frango (um critério de seleção) e em sete de 12 (58%) cães alérgicos a frango. O imunoblotting realizado com o mesmo extrato revelou bandas de proteína ligada a IgE em 100% de todos os cães sensibilizados e alérgicos a frango, respectivamente. Para a identificação dos alérgenos, retiramos as bandas correspondentes do gel eletroforético e as submetemos ao sequenciamento por espectrometria de massa. Identificamos então sete alérgenos principais (albumina sérica, piruvato quinase M, enolase 3, creatina quinase M, lactato desidrogenase A, gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase e triose-fosfato isomerase) e um alérgeno secundário (troponina C), que são relevantes para cães. CONCLUSÕES E RELEVÂNCIA: Nós identificamos neste estudo sete alérgenos principais para cães, muitos deles conhecidos por serem alérgenos de reação cruzada para humanos. Baseado no seu grau de identidade de sequência, estes alérgenos possuem o potencial teórico de apresentarem reação cruzada entre frango e carnes de mamíferos; seis desses alérgenos já são reconhecidos por causar reação cruzada entre frango e espécies de peixes. Estudos futuros devem focar na relevância clínica e no potencial desses alérgenos de frango de causar reações cruzadas em cães.Todos os autores receberam apoio financeiro da Royal Canin tanto para consultoria (TO), palestras (TO e UM) ou projetos de pesquisa (TO, CMPH, UM, KB e JB).INTRODUCCIÓN: No se han reportado alérgenos diana de la inmunoglobulina E específica del suero (sIgE) en perros clínicamente alérgicos al pollo.Caracterizar los alérgenos a los que se dirige sIgE en perros sensibilizados y alérgicos al pollo.Tres sueros de perros no sensibilizados al pollo, 10 sueros de perros sensibilizados al pollo y 12 sueros de perros alérgicos al pollo. MÉTODOS Y MATERIALES: Se utilizaron el ensayo de inmunoabsorción ligado a enzimas (ELISA) y la inmunotransferencia con un extracto comercial de pollo. Las bandas identificadas en la inmunotransferencia se secuenciaron mediante espectrometría de masas para la caracterización de alérgenos.Utilizando ELISA, detectamos pollo-sIgE por encima del umbral positivo en cero de tres (0%) perros no sensibilizados, cinco de cinco (100%) perros sensibilizados con pollo (un criterio de selección) y en siete de 12 (58%) ) perros alérgicos al pollo. La inmunotransferencia realizada con el mismo extracto reveló bandas de proteína unidas a IgE en el 100% de todos los perros alérgicos y sensibilizados con pollo, respectivamente. Para identificar los alérgenos, escindimos las bandas correspondientes en el gel electroforético y las enviamos para secuenciarlas por espectrometría de masas. Identificamos de manera concluyente siete alérgenos principales (albúmina sérica, piruvato quinasa M, enolasa 3, creatina quinasa M, lactato deshidrogenasa A, gliceraldehído-3-fosfato deshidrogenasa y triosa-fosfato isomerasa) y un alérgeno menor (troponina C), que son relevantes en perros. CONCLUSIONES Y RELEVANCIA CLÍNICA: En este documento identificamos siete alérgenos principales de pollo para perros, varios de los cuales se sabe que son alérgenos de reacción cruzada para los seres humanos. En base en su grado de identidad en secuencia, estos alérgenos exhiben el potencial teórico de tener una reacción cruzada entre las carnes de aves de corral y de mamíferos; ya se sabe que seis de estos alérgenos presentan una reacción cruzada entre las especies de pollo y pescado. Los estudios futuros deben abordar la relevancia clínica y el potencial de reactividad cruzada de estos alérgenos de pollo en perros.Todos los autores han recibido apoyo financiero de Royal Canin para proyectos de consultoría (TO), conferencias (TO y UM) o de investigación (TO, CMPH, UM, KB y JB).