生肌液-明胶-壳聚糖载药皮肤支架的细胞相容性

背景：组织工程皮肤对于大面积皮肤缺损的修复与重建具有重要作用，含有中药的组织工程皮肤支架对于细胞黏附及创面感染控制的作用研究并不多见。目的：利用角质形成细胞与成纤维细胞筛选生肌液应用浓度，观察生肌液-明胶壳聚糖载药皮肤支架对细胞黏附及生物相容性影响。设计、时间及地点：以角质形成细胞与成纤维细胞为观察对象，随机对照实验，于2005—02／08在天津市犬津医院骨科研究所细胞工程室完成。材料：健康大耳白兔1只，用于获取皮肤种子细胞：生肌液、当归提取液及生地提取液（A行提取，1．5g／mL），明胶-壳聚糖支架及生肌液-明胶壳聚糖支架由天津大学提供。方法：①以dispaseⅡ-胰蛋白酶EDTA消化法获取第3代角质形成细胞与成纤维细胞。②实验分为5组，对照组为普通培养液（含体积分数为0.1胎牛血清的基础培养基）；牛肌液组为含有生肌液质量浓度分别为5，6，8，12g／L的培养液；当归纽为含有当归提取液质量浓度为8g／L的培养液；生地组为含有生地提取液质量浓度为8g／L的培养液：表皮生长因子组为含有10μg／L表皮生长因子的培养液；分别用于培养第3代角质形成细胞和成纤维细胞，于1，3，5，7d用MTT法检测细胞的增殖情况。③制备基质中生肌液质量浓度分别为50，60，80，120g／L的载药支架组，将上述细胞在支架上培养，分别于7，14d用半定量方法观察细胞与支架的黏附情况。④60，80g／L载药支架组种植角质形成细胞，分别于4，7，14d取材，进行苏水精-伊红染色和扫描电镜观察。主要观察指标：①生肌液对皮肤种子细胞增值的影响。②载药支架对细胞黏附的影响。③细胞与载体的相容性。结果：①MTT检测结果表明，5、6、8g／L的生肌液组细胞增殖较快，与对照组相比，差异有显著性意义（P〈0．05）。�