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益生屎肠球菌的细胞壁脂磷壁酸提取和纯化条件的研究
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| 其它 | 本研究的目的是确定屎肠球菌EF1细胞壁脂磷壁酸提取和纯化的适宜条件,为获取高纯度且质量稳定的脂磷壁酸提供切实可行的方法。采用活菌计数法研究屎肠球菌EF1的生长规律;用离心法收集细菌细胞研究细菌生物量;用水饱和正丁醇提取脂磷壁酸,研究细胞破壁时间和正丁醇萃取时间对提取物得率的影响;研究疏水作用层析和离子交换作用层析对脂磷壁酸的纯化效果,为日后获取高纯度且质量稳定的脂磷壁酸用于机理研究奠定基础。主要研究结果如下:(1)屎肠球菌EF1在MRS培养基37℃静止培养24 h达到对数生长末期,36 h之后进入稳定期。在对数生长末期的生物量最高,为3.22 g/L,比稳定期增加22.43%(P<0.01)。细菌离心15 min得到的生物量比12 min提高12.20%(P>0.05)。(2)细胞破壁70 min和正丁醇提取60 min的屎肠球菌EF1的脂磷壁酸得率最高,为2.27%(P<0.01)。(3)屎肠球菌EF1的脂磷壁酸粗提物用辛基琼脂糖凝胶层析时,用35%正丙醇乙酸钠缓冲液洗脱脂磷壁酸比用15-60%线性梯度洗脱效果更好。DEAE离子交换层析对脂磷壁酸的进一步纯化效果不明显 |
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shinysparrow
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