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Real-time PCR-based genotyping from whole blood using Taq DNA polymerase and a buffer supplemented with 1,2-propanediol and trehalose

基因分型 聚合酶 聚合酶链反应 数字聚合酶链反应 底漆二聚体 DNA提取 分子生物学 生物 DNA 实时聚合酶链反应 全血 荧光染料 多重位移放大 PCR的应用 热启动PCR 聚合酶 底漆(化妆品) 多重聚合酶链反应 聚合酶链反应优化 DNA聚合酶 化学 基因型 遗传学 水热 基因 免疫学
作者
Pavol Utekal,Lukas Kocanda,Petr Matousek,Petr Wagner,Lubica Dráberová,Petr Dráber
出处
期刊:Journal of Immunological Methods [Elsevier]
标识
DOI:10.1016/j.jim.2014.09.006
摘要

Amplification of DNA templates from whole blood with Taq DNA polymerase remains a difficult task worldwide. Using a real-time PCR setup and a buffer supplemented with 1M 1,2-propanediol, 0.2M trehalose, and SYBR green I we show a reliable technique for genotyping in mice and detection of single-nucleotide polymorphisms/mutations in humans. Elimination of DNA extraction and use of the common Taq DNA polymerase and DNA dye bring about substantial savings in labor and cost.
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