Capillary electrophoresis method to determine siRNA complexation with cationic liposomes

毛细管电泳 阳离子聚合 化学 脂质体 色谱法 阳离子脂质体 试剂 纳米颗粒 组合化学 电泳 小干扰RNA 纳米技术 核糖核酸 转染 生物化学 材料科学 基因 有机化学
作者
Tania Furst,Virginie Bettonville,Elena Farcaş,Antoine Frère,Anna Lechanteur,Brigitte Évrard,Marianne Fillet,Géraldine Piel,Anne‐Catherine Servais
出处
期刊:Electrophoresis [Wiley]
卷期号:37 (20): 2685-2691 被引量:7
标识
DOI:10.1002/elps.201600249
摘要

Small interfering RNA (siRNA) inducing gene silencing has great potential to treat many human diseases. To ensure effective siRNA delivery, it must be complexed with an appropriate vector, generally nanoparticles. The nanoparticulate complex requires an optimal physiochemical characterization and the complexation efficiency has to be precisely determined. The methods usually used to measure complexation in gel electrophoresis and RiboGreen® fluorescence-based assay. However, those approaches are not automated and present some drawbacks such as the low throughput and the use of carcinogenic reagents. The aim of this study is to develop a new simple and fast method to accurately quantify the complexation efficiency. In this study, capillary electrophoresis (CE) was used to determine the siRNA complexation with cationic liposomes. The short-end injection mode applied enabled siRNA detection in less than 5 min. Moreover, the CE technique offers many advantages compared with the other classical methods. It is automated, does not require sample preparation and expensive reagents. Moreover, no mutagenic risk is associated with the CE approach since no carcinogenic product is used. Finally, this methodology can also be extended for the characterization of other types of nanoparticles encapsulating siRNA, such as cationic polymeric nanoparticles.

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