A new approach for point mutation detection based on a ligase chain reaction

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作者
Anna V Demchinskaya,И. А. Шилов,A. S. Karyagina,В. Г. Лунин,Olga V. Sergienko,Olga Voronina,Matthias Leiser,Lutz Plobner
出处
期刊:Journal of Biochemical and Biophysical Methods [Elsevier BV]
卷期号:50 (1): 79-89 被引量:9
标识
DOI:10.1016/s0165-022x(01)00178-6
摘要

A new method for the identification of point mutations is proposed. The method is based on ligase chain reaction (LCR) and it includes a procedure for correction of ligation by Cleavase. Reaction products are detected by a colorimetric method after adsorption of the resulting DNA duplexes to the solid phase. One strand of LCR products carries biotin to be bound on a streptavidin-coated microwell. Another strand contains a single-stranded region that is to be coupled with an oligonucleotide carrying a substrate for colorimetric detection. The suggested method has two advantages: (i) use of Cleavase increases the accuracy of ligation and (ii) a template independent ligation does not occur in LCR due to a special design of primers.
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