Salting out of Proteins Using Ammonium Sulfate Precipitation

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作者
Krisna C. Duong‐Ly,Sandra B. Gabelli
出处
期刊:Methods in Enzymology [Academic Press]
卷期号:: 85-94 被引量:273
标识
DOI:10.1016/b978-0-12-420119-4.00007-0
摘要

Protein solubility is affected by ions. At low ion concentrations (<0.5 M), protein solubility increases along with ionic strength. Ions in the solution shield protein molecules from the charge of other protein molecules in what is known as 'salting-in'. At a very high ionic strength, protein solubility decreases as ionic strength increases in the process known as 'salting-out'. Thus, salting out can be used to separate proteins based on their solubility in the presence of a high concentration of salt. In this protocol, ammonium sulfate will be added incrementally to an E. coli cell lysate to isolate a recombinantly over-expressed protein of 20 kDa containing no cysteine residues or tags.
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