Coimmunoprecipitation of Interacting Proteins in Plants

烟草 免疫沉淀 根癌农杆菌 细胞生物学 生物 表位 农业渗透 体内 生物化学 基因 遗传学 抗体 转基因
作者
Alfonso Muñoz,M. Mar Castellano
出处
期刊:Methods in molecular biology 卷期号:: 279-287 被引量:20
标识
DOI:10.1007/978-1-4939-7871-7_19
摘要

Protein-protein interactions discovered by yeast two-hybrid systems must be confirmed in vivo in a homologous system. In the case of plants, one of the easiest and fastest methods to validate protein interactions in vivo is the transient expression of the proteins in Nicotiana benthamiana leaves followed by coimmunoprecipitation. This method consists of the following steps: growth of the appropriate Agrobacterium tumefaciens cultures, preparation of the infiltration mixtures, infiltration into N. benthamiana leaves, protein extraction and immunoprecipitation. The utilization of epitope tags to immunoprecipitate and detect the proteins of interest is very useful in this procedure. In this chapter we describe a standard protocol to coimmunoprecipitate proteins expressed in N. benthamiana leaves.
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