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Hybridization and Immobilization of Long ds-DNAs on Polystyrene Microspheres

寡核苷酸 聚苯乙烯 DNA 微球 化学 噬菌体 质粒 DNA–DNA杂交 分子生物学 动力学 高分子化学 材料科学 聚合物 化学工程 生物化学 生物 有机化学 基因 大肠杆菌 工程类 物理 量子力学
作者
Debalina Ghosh,Nicolas Faure,Sharmistha Kundu,F. Rondelez,Dipankar Chatterji
出处
期刊:Langmuir [American Chemical Society]
卷期号:19 (14): 5830-5837 被引量:15
标识
DOI:10.1021/la0341963
摘要

Here, we develop a system where long double-stranded DNAs (ds-DNAs) are immobilized on the surface of a polystyrene (PS) microsphere. A simple synthetic strategy is adopted in order to achieve this goal in which a single DNA chain is anchored by one of its extremities to a latex (PS) microsphere. We chose hybridization as a unique method to attach long ds-DNA chains in solution with oligonucleotides grafted on modified aminated polystyrene microspheres. The DNAs chosen were of various sizes and sources: T7A1 DNA (4.48 kilobase pair (kbp)), a plasmid DNA; and ΔDIIIT7 DNA (39.34 kbp), a mutant of bacteriophage T7 DNA. The temperature dependence of the kinetics of hybridization of T7A1 DNA (4.48 kbp) in solution with an appropriate oligonucleotide (20-mer sequence) grafted on modified aminated polystyrene microspheres yielded a value of activation energy of ∼5.3 kcal/mol, consistent with a non-diffusion-controlled mechanism.
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