Electrochemical Determination of Activity of Acetylcholinesterase Immobilized on Magnetic Particles

Acetylcholinesterasa (AChE) je enzym ukoncujici přenos vzruchů v cholinergnim systemu. Aktivita enzymu se běžně vysetřuje Ellmanovou metodou, ktera ma ovsem nedostatky jako je nestabilita použitých reagencii. Dalsi nevýhodou je neschopnost využit enzym znovu. Proto jsme vyvinuli proces využivajici EDC pro imobilizaci AChE na povrch magnetických castic, ktere nabizeji možnost separovat enzym a znovu jej využit. Pro stanoveni enzyove aktivity jsme optimalizovali metodu square wave voltametrie za použiti tistěných elektrod modifikovaných Pruskou modři. Pro testovaný inhibitor AChE, takrin, jsme ziskali detekcni limit 8,1 μM. V porovnani se standardni Ellmanovou metodou, imobilizovaný enzym ma limitovanou citlivost k organickým rozpoustědlům.