Split mCherry as a new red bimolecular fluorescence complementation system for visualizing protein–protein interactions in living cells

双分子荧光互补 麦克赫里 互补 蛋白质-蛋白质相互作用 荧光 绿色荧光蛋白 融合蛋白 生物物理学 化学 生物 细胞生物学 突变体 生物化学 基因 物理 重组DNA 量子力学
作者
Jinyu Fan,Zongqiang Cui,Hongping Wei,Zhiping Zhang,Yafeng Zhou,Yunpeng Wang,Xian‐En Zhang
出处
期刊:Biochemical and Biophysical Research Communications [Elsevier]
卷期号:367 (1): 47-53 被引量:153
标识
DOI:10.1016/j.bbrc.2007.12.101
摘要

Bimolecular fluorescence complementation (BiFC) is a recently developed technique for detection of protein–protein interactions in living cells. In this study, a new red BiFC system was developed by splitting mCherry, a mutant monomeric red fluorescent protein, into two fragments between amino acids 159–160 and was verified using a pair of interacting proteins, SV40 large T antigen (LTag), and human p53 protein. By combined use of the mCherry-based red BiFC system with a Venus-based yellow BiFC system, the interaction between LTag and p53 as well as the interaction between sp100 and promyelocytic leukemia protein (PML), were detected simultaneously in Vero cells. The brilliant redness, short maturation time, and the long excitation and emission wavelengths (587/610 nm) of mCherry make the new BiFC system an excellent candidate for analyzing protein–protein interactions in living cells and for studying multiple protein–protein interactions when coupled with other BiFC systems.
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