Molecular Beacon Aptamers for Direct and Universal Quantitation of Recombinant Proteins from Cell Lysates

重组DNA 溶解 化学 适体 Myc标签 融合蛋白 标志标签 免疫印迹 分子生物学 靶蛋白 生物化学 基因 生物
作者
Xiaohong Tan,Weijun Chen,Shun Lu,Zhi Zhu,Tao Chen,Guizhi Zhu,Mingxu You,Weihong Tan
出处
期刊:Analytical Chemistry [American Chemical Society]
卷期号:84 (19): 8272-8276 被引量:26
标识
DOI:10.1021/ac301764q
摘要

Western blot, enzyme linked immunosorbent assay (ELISA), and fluorescent fusion proteins are currently the most common methods for detecting recombinant proteins. However, the former two are cumbersome and time-consuming, and the latter method may interfere with the trafficking and function of the fused recombinant proteins. We report here a rapid, inexpensive, and simple approach to detect and quantify recombinant proteins using an anti-His-tag molecular beacon aptamer (HMBA). We demonstrated the technique by detection and quantitation of expressed recombinant proteins directly from E. coli cell lysate. The amount of expressed P78-His was determined to be 1.49 μg from the 20 μg cell lysate proteins. To the best of our knowledge, this is the first example directly measuring the concentration and expression yield of recombinant proteins from cell lysate, and the entire procedure required only 5 min.

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