The isolation of bacterial nucleic acids using cetyltrimethylammonium bromide (Cetavlon)

Nucleic acids have been isolated from Myco. tuberculosis, Myco. phlei and Sarcina lutea by a new mild method. The nucleoproteins were extracted from disintegrated cells of the organisms, or in the case of Myco. tuberculosis from urea-extracted cells, and then precipitated with cetyltrimethylammonium bromide (Cetavlon). The Cetavlon-nucleoprotein complex was dissolved in 1 M sodium chloride and reprecipitated by dilution with two volumes of water. This purification procedure was repeated several times. The protein and Cetavlon were removed by repeatedly shaking a solution of the complex in 1 M sodium chloride with chloroform and octanol (9:1). The nucleic acids were obtained as white fibrous solids which were mixtures of desoxypentosenucleic acid and pentosenucleic acid. Des acides nucléiques ont été isolés par une méthode douce nouvelle, à partir de Myco. tuberculosis Myco. phlei et Sarcina lutea. Les nucléoprotéines furent extraites de cellules désintégrées ou, dans le cas de Myco. tuberculosis, de cellules extraites à l'urée; elles furent ensuite précipitées par le bromure de cétyl-triméthyl-ammonium (Cetavlon). Le complexe nucléoprotéines-Cetavlon, dissous dans une solution 1 M de chlorure de sodium, a été reprécipité par dilution avec deux volumes d'eau. Ce procédé de purification a été répété plusieurs fois. La protéine et le Cetavlon ont été éliminés par agitation répétée de la solution du complexe dans du chlorure de sodium 1 M avec un mélange chloroforme-octanol (9:1). Les acides nucléiques, obtenus sous forme de solides blancs fibreux, étaient des mélanges d'acides désoxypentose- et pentosenucléique. Es wurden Nukleinsäuren aus Myco. tuberculosis, Myco. phlei und Sarcina lutea mit einer neuen milden Methode isoliert. Die Nukleoproteine wurden extrahiert aus zerstörten Zellen der Organismen oder, im Fall von Myco. tuberculosis, aus mit Harnstoff extrahierten Zellen und dan mit Cetyltrimethylammoniumbromid (Cetavlon) gefällt. Der Cetavlon-Nukleoproteinkomplex wurde in 1 M Natriumchlorid aufgelöst und durch Verdünnung mit zwei Volumen Wasser wieder ausgefällt. Dieses Reinigungsverfahren wurde mehrere Male wiederholt. Das Protein und das Cetavlon wurde durch wiederholtes Schütteln einer Lösung des Komplexes in 1 M Natriumchlorid mit Chloroform und Oktanol (9:1) entfernt. Die Nukleinsäuren wurden als weisse faserige Massen erhalten, die Mischungen von Desoxypentosenukleinsäure und Pentosenukleinsäure darstellen.