Sequential Activation of DNA Sensor Enables Correlated Imaging of Dual-Enzyme Activities in Living Cells

化学 对偶(语法数字) DNA 生物物理学 计算生物学 纳米技术 生物化学 艺术 材料科学 文学类 生物
作者
Xian Wang,Deyu Yi,Mengyuan Li,Zhengping Li
出处
期刊:Analytical Chemistry [American Chemical Society]
标识
DOI:10.1021/acs.analchem.4c05454
摘要

The DNA repair system relies on the coordinated action of multiple enzymes to maintain genomic stability, with apurinic/apyrimidinic endonuclease 1 (APE1) and flap endonuclease 1 (FEN1) playing pivotal roles in the long-patch base excision repair (LP-BER) pathway. Elevated levels of APE1 and FEN1 have been associated with tumor progression and resistance to therapy, making them key biomarkers for cancer diagnosis and treatment monitoring. Here, we present a sequentially activated AND-logic DNA sensor (D-AF) for the correlated imaging of APE1 and FEN1 in living cells. The sensor operates through a sequential process: APE1 first recognizes and cleaves an apurinic site, initiating structural changes that enable FEN1 to cleave a 5' flap, resulting in restored fluorescence. We demonstrate the use of the D-AF-based nanosensor for in situ imaging of APE1 and FEN1 activities in cancer cells and for monitoring of enzyme dynamics during chemotherapy. This platform offers a valuable tool for investigating DNA repair mechanisms and their roles in cancer diagnosis and treatment.
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