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A Ratiometric Two-Photon Fluorescent Probe Reveals Reduction in Mitochondrial H2S Production in Parkinson’s Disease Gene Knockout Astrocytes

化学 荧光 活性氧 氧化应激 胱硫醚β合酶 双光子激发显微术 硫化氢 神经保护 生物物理学 线粒体 生物化学 细胞生物学 分子生物学 硫黄 药理学 生物 量子力学 物理 有机化学 半胱氨酸
作者
Sung Keun Bae,Cheol Ho Heo,Dong‐Joo Choi,Debabrata Sen,Eun-Hye Joe,Bong Rae Cho,Hwan Myung Kim
出处
期刊:Journal of the American Chemical Society [American Chemical Society]
卷期号:135 (26): 9915-9923 被引量:395
标识
DOI:10.1021/ja404004v
摘要

Hydrogen sulfide (H2S) is a multifunctional signaling molecule that exerts neuroprotective effects in oxidative stress. In this article, we report a mitochondria-localized two-photon probe, SHS-M2, that can be excited by 750 nm femtosecond pulses and employed for ratiometric detection of H2S in live astrocytes and living brain slices using two-photon microscopy (TPM). SHS-M2 shows bright two-photon-excited fluorescence and a marked change in emission color from blue to yellow in response to H2S, low cytotoxicity, easy loading, and minimum interference from other biologically relevant species including reactive sulfur, oxygen, and nitrogen species, thereby allowing quantitative analysis of H2S levels. Molecular TPM imaging with SHS-M2 in astrocytes revealed that there is a correlation between the ratiometric analysis and expression levels of cystathionine β-synthase (CBS), the major enzyme that catalyzes H2S production. In studies involving DJ-1, a Parkinson's disease (PD) gene, attenuated H2S production in comparison with wild-type controls was observed in DJ-1-knockout astrocytes and brain slices, where CBS expression was decreased. These findings demonstrate that reduced H2S levels in astrocytes may contribute to the development of PD and that SHS-M2 may be useful as a marker to detect a risk of neurodegenerative diseases, including PD.
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