Split intein-mediated protein trans-splicing to express large dystrophins

英特因 杜氏肌营养不良 RNA剪接 肌营养不良蛋白 基因 限制 肌营养不良 生物 剪接 遗传学 计算生物学 生物信息学 核糖核酸 机械工程 工程类
作者
Hichem Tasfaout,Christine L. Halbert,James M. Allen,Theodore Reyes,Dirk Grimm,Stephen D. Hauschka,Jeffrey S. Chamberlain
出处
期刊:Research Square - Research Square
标识
DOI:10.21203/rs.3.rs-2924001/v1
摘要

Abstract Gene replacement using Adeno-associated viral (AAV) vectors represents a promising approach for many diseases. However, this therapeutic modality is challenged by the modest packaging capacity of AAVs (~4.7 kb), limiting its application for disorders involving large genes, such as Duchenne muscular dystrophy with a coding sequence >11 kb. Here we developed a novel method for expressing large dystrophins by utilizing the protein trans-splicing mechanism mediated by split inteins. We identified several split intein pairs that can efficiently join two or three fragments and generate, respectively, a large midi-dystrophin or the entire full-length dystrophin. We show that the delivery of two or three AAVs into dystrophic mice results in robust expression of large dystrophins with significant functional improvements compared with current micro-dystrophins. Moreover, using the potent myotropic AAVMYO, we demonstrate that low doses (2x1013 vg/kg) are sufficient to express large dystrophins in striated muscles bodywide with significant physiological corrections in young or very old dystrophic mice. Our data support the feasibility of this approach in vivo and show a clear superiority of large dystrophins over micro-dystrophins that are being tested in clinical trials. This novel method could benefit any patient with Duchenne or Becker muscular dystrophy regardless of genotype and could be adapted to numerous other disorders caused by mutations in large genes exceeding the carrying capacity of AAV.
最长约 10秒,即可获得该文献文件

科研通智能强力驱动
Strongly Powered by AbleSci AI
更新
大幅提高文件上传限制,最高150M (2024-4-1)

科研通是完全免费的文献互助平台,具备全网最快的应助速度,最高的求助完成率。 对每一个文献求助,科研通都将尽心尽力,给求助人一个满意的交代。
实时播报
小雨完成签到,获得积分10
1秒前
zs发布了新的文献求助10
1秒前
yiyilinlin完成签到,获得积分10
2秒前
快不了完成签到,获得积分10
3秒前
不可思宇完成签到,获得积分10
3秒前
汕头凯奇完成签到,获得积分10
3秒前
3秒前
阿刁完成签到,获得积分10
4秒前
沉默的钻石完成签到,获得积分10
5秒前
哈哈镜完成签到,获得积分10
5秒前
超级的抽屉完成签到,获得积分10
6秒前
屋子完成签到,获得积分10
7秒前
义气小白菜完成签到 ,获得积分10
7秒前
lgz完成签到,获得积分10
7秒前
meiyang完成签到 ,获得积分10
7秒前
小七完成签到,获得积分10
7秒前
jagger完成签到,获得积分10
7秒前
831143完成签到 ,获得积分0
7秒前
低头啃草牛完成签到,获得积分10
9秒前
yg完成签到,获得积分10
9秒前
9秒前
ZX612完成签到,获得积分10
10秒前
hh完成签到 ,获得积分10
10秒前
哈哈镜发布了新的文献求助10
10秒前
vampire完成签到,获得积分10
10秒前
逝者如斯只是看着完成签到,获得积分10
10秒前
小二郎应助中央戏精学院采纳,获得10
12秒前
张世豪完成签到,获得积分10
12秒前
kannar完成签到,获得积分10
13秒前
kakaC完成签到,获得积分10
13秒前
齐美丽发布了新的文献求助10
14秒前
zzz完成签到,获得积分10
17秒前
阿尔法贝塔完成签到 ,获得积分10
17秒前
大土豆子完成签到,获得积分10
17秒前
Fanzhijuan完成签到,获得积分10
17秒前
wsh完成签到,获得积分10
17秒前
一自文又欠完成签到,获得积分10
18秒前
Huang完成签到 ,获得积分0
18秒前
子夜完成签到,获得积分10
19秒前
敏感的归头完成签到,获得积分10
20秒前
高分求助中
Evolution 10000
CANCER DISCOVERY癌症研究的新前沿:中国科研领军人物的创新构想 中国专刊 500
Distribution Dependent Stochastic Differential Equations 500
A new species of Coccus (Homoptera: Coccoidea) from Malawi 500
A new species of Velataspis (Hemiptera Coccoidea Diaspididae) from tea in Assam 500
PraxisRatgeber: Mantiden: Faszinierende Lauerjäger 500
Die Gottesanbeterin: Mantis religiosa: 656 400
热门求助领域 (近24小时)
化学 医学 生物 材料科学 工程类 有机化学 生物化学 物理 内科学 纳米技术 计算机科学 化学工程 复合材料 基因 遗传学 催化作用 物理化学 免疫学 量子力学 细胞生物学
热门帖子
关注 科研通微信公众号,转发送积分 3158687
求助须知:如何正确求助?哪些是违规求助? 2809923
关于积分的说明 7884302
捐赠科研通 2468638
什么是DOI,文献DOI怎么找? 1314374
科研通“疑难数据库(出版商)”最低求助积分说明 630601
版权声明 602012