基于LC-QTOF-MS技术对石榴皮多酚提取物的化学成分研究及药材资源的品质评价

石榴皮是石榴科植物石榴（Punica granatum L.）的干燥果皮，系多种维吾尔医和中医处方的组成部分，具有多种生物学活性和药理学作用。本研究以前期工作为基础，开展石榴皮多酚提取物的物质基础和药材资源品质研究，为石榴皮多酚提取方法的标准化及其与国际标准接轨提供依据。1. 石榴皮多酚提取物的物质基础和质量标准研究（1）采用液质联用质谱（LC-QTOF-MS）方法，对石榴皮多酚提取物的主要成分和微量成分进行结构分析，鉴别出50种多酚类化合物，包括35种水解鞣质和15种黄酮类，其中首次报道2种鞣质类和7种黄酮类成分；（2）以10批次石榴皮多酚提取物为原料进行超高效液相色谱（UPLC-PDA）指纹图谱研究，确认12个的特征峰，建立了石榴皮多酚的指纹图谱鉴别模式，继而确定了安石榴苷、鞣花酸、安石榴林、没食子儿茶素、柯里拉京、紫云英苷等7种石榴皮化学成分的含量；（3）在此基础上，首次建立了石榴皮多酚标准提取物的质量控制标准，其中制定提取物中安石榴苷含量不得低于30.0%，鞣花酸含量不得低于2.0%。2. 石榴皮药材资源品质的评价研究增设安石榴苷、安石榴林和鞣花酸三种鉴别项，优化了薄层色谱（TLC）方法；采用高效液相色谱（HPLC）建立了安石榴苷和鞣花酸的测定方法；以新疆产23批石榴皮药材为原料，建立了石榴皮药材UPLC-PDA指纹图谱；结合上述优化条件和指纹图谱相似度分析，对国内外石榴皮药材进行品质比较分析，发现新疆、陕西、四川、伊朗、乌兹别克斯坦等不同产地和品种石榴皮药材品质存在一定的差异，为石榴皮药材和提取物为原料的新药研发提供了科学依据。3. 石榴皮安石榴苷等指标成分的标准品研制对新疆石榴皮多酚进行溶剂提取、大孔吸附树脂富集、制备液相色谱纯化，获得了安石榴苷、安石榴林、鞣花酸等三种指标性成分，其HPLC纯度均为98%以上；按照天然产物国家标准样品制备技术要求，对上述三种化学成分进行结构确证、稳定性和均匀性研究，制定其有效期和不确定度，解决了民族药标准样品的缺乏问题，为完善药材、原料药和成药的质量控制标准提供了依据。