Fast preparation of high-quality viral dsRNA from fungal tissue by commercial nucleic acid extraction kits

RNA沉默 生物 核糖核酸 核酸 真菌病毒 RNA提取 萃取(化学) 病毒学 病毒 生物化学 RNA干扰 色谱法 化学 基因 RNA聚合酶
作者
Tobias Lutz,Mareike Jaeckel,Birgit Hadeler,Cornelia Heinze
出处
期刊:Journal of Virological Methods [Elsevier]
卷期号:322: 114832-114832 被引量:1
标识
DOI:10.1016/j.jviromet.2023.114832
摘要

The genomes of most known mycoviruses consist of double stranded RNA (dsRNA) or single stranded RNA (ssRNA). Therefore, for all aspects of mycovirology, the research is highly dependent on the quality and quantity of RNA either by the extraction of genomic dsRNA or dsRNA as a replicating intermediate. A common procedure to extract dsRNA is its binding on a cellulose matrix after a phenol/chloroform purification step. A commercial kit for dsRNA extraction facilitated the researchers´ daily work, but is not available anymore. To extract nucleic acids in a standardized good quality and quantity from small amounts of starting material, we compared commercial kits for gDNA extraction to the kits for RNA extraction using fungal material with a high and a low virus titer. Here we show that viral dsRNA can be extracted using commercial gDNA kits from fungal tissue with a high and a low virus titer in the same quality and quantity as it was done with the discontinued dsRNA extraction kit.
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