Native RNA nanopore sequencing reveals antibiotic-induced loss of rRNA modifications in the A- and P-sites

核糖体RNA 核糖核酸 核酸结构 纳米孔测序 生物 计算生物学 核糖体 抗生素 遗传学 基因 DNA测序
作者
Anna Delgado-Tejedor,Rebeca Medina,Oguzhan Begik,Luca Cozzuto,Judith López,Sandra Blanco,Julia Ponomarenko,Eva Maria Novoa
出处
期刊:Nature Communications [Nature Portfolio]
卷期号:15 (1) 被引量:5
标识
DOI:10.1038/s41467-024-54368-x
摘要

The biological relevance and dynamics of mRNA modifications have been extensively studied; however, whether rRNA modifications are dynamically regulated, and under which conditions, remains unclear. Here, we systematically characterize bacterial rRNA modifications upon exposure to diverse antibiotics using native RNA nanopore sequencing. To identify significant rRNA modification changes, we develop NanoConsensus, a novel pipeline that is robust across RNA modification types, stoichiometries and coverage, with very low false positive rates, outperforming all individual algorithms tested. We then apply NanoConsensus to characterize the rRNA modification landscape upon antibiotic exposure, finding that rRNA modification profiles are altered in the vicinity of A and P-sites of the ribosome, in an antibiotic-specific manner, possibly contributing to antibiotic resistance. Our work demonstrates that rRNA modification profiles can be rapidly altered in response to environmental exposures, and provides a robust workflow to study rRNA modification dynamics in any species, in a scalable and reproducible manner. It remains unclear whether rRNA modifications can be naturally altered in response to antibiotics in bacteria. Here, the authors analyzed direct RNA nanopore sequencing data with an analytical pipeline Nanoconsensus, to investigate whether bacterial rRNA modifications are modulated upon exposure to various antibiotics.
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