清晨好,您是今天最早来到科研通的研友!由于当前在线用户较少,发布求助请尽量完整的填写文献信息,科研通机器人24小时在线,伴您科研之路漫漫前行!

LC‐MS/MS as an alternative for SDS‐PAGE in blue native analysis of protein complexes

蛋白质组 生物发生 伴侣(临床) 免疫沉淀 生物化学 氧化还原酶 化学 聚丙烯酰胺凝胶电泳 蛋白质组学 生物 蛋白质-蛋白质相互作用 医学 病理 基因
作者
Hans J. C. T. Wessels,Rutger O. Vogel,Lambert van den Heuvel,Jan A.M. Smeitink,Richard J. Rodenburg,Leo Nijtmans,Murtada H. Farhoud
出处
期刊:Proteomics [Wiley]
卷期号:9 (17): 4221-4228 被引量:94
标识
DOI:10.1002/pmic.200900157
摘要

Abstract Two‐dimensional blue native/SDS‐PAGE is widely applied to investigate native protein–protein interactions, particularly those within membrane multi‐protein complexes. MS has enabled the application of this approach at the proteome scale, typically by analysis of picked protein spots. Here, we investigated the potential of using LC‐MS/MS as an alternative for SDS‐PAGE in blue native (BN) analysis of protein complexes. By subjecting equal slices from BN gel lanes to label‐free semi‐quantitative LC‐MS/MS, we determined an abundance profile for each protein across the BN gel, and used these profiles to identify potentially interacting proteins by protein correlation profiling. We demonstrate the feasibility of this approach by considering the oxidative phosphorylation complexes I–V in the native human embryonic kidney 293 mitochondrial fraction, showing that the method is capable of detecting both the fully assembled complexes as well as assembly/turnover intermediates of complex I (NADH:ubiquinone oxidoreductase). Using protein correlation profiling with a profile for subunits NDUFS2, 3, 7 and 8 we identified multiple proteins possibly involved in the biogenesis of complex I, including the recently implicated chaperone C6ORF66 and a novel candidate, C3ORF60.
最长约 10秒,即可获得该文献文件

科研通智能强力驱动
Strongly Powered by AbleSci AI
更新
大幅提高文件上传限制,最高150M (2024-4-1)

科研通是完全免费的文献互助平台,具备全网最快的应助速度,最高的求助完成率。 对每一个文献求助,科研通都将尽心尽力,给求助人一个满意的交代。
实时播报
在阳光下完成签到 ,获得积分10
3秒前
bruna发布了新的文献求助10
3秒前
22秒前
25秒前
27秒前
研友_nxw2xL完成签到,获得积分10
50秒前
muriel完成签到,获得积分10
56秒前
紫熊发布了新的文献求助10
59秒前
cy0824完成签到 ,获得积分10
1分钟前
woxinyouyou完成签到,获得积分0
1分钟前
1分钟前
2分钟前
2分钟前
就是我发布了新的文献求助10
2分钟前
liuzhigang完成签到 ,获得积分10
2分钟前
2分钟前
2分钟前
3分钟前
3分钟前
爱静静举报孔明不在空城求助涉嫌违规
3分钟前
善学以致用应助无限语海采纳,获得10
3分钟前
4分钟前
Tttttttt完成签到,获得积分10
4分钟前
fighting发布了新的文献求助10
4分钟前
就是我完成签到,获得积分10
4分钟前
淡淡醉波wuliao完成签到 ,获得积分10
5分钟前
6分钟前
无限语海发布了新的文献求助10
6分钟前
6分钟前
无限语海完成签到,获得积分10
6分钟前
6分钟前
春日迟迟2012完成签到 ,获得积分10
7分钟前
7分钟前
8分钟前
紫熊发布了新的文献求助10
8分钟前
8分钟前
8分钟前
紫熊完成签到,获得积分10
9分钟前
Malmever完成签到,获得积分10
9分钟前
9分钟前
高分求助中
Evolution 10000
Sustainability in Tides Chemistry 2800
юрские динозавры восточного забайкалья 800
English Wealden Fossils 700
An Introduction to Geographical and Urban Economics: A Spiky World Book by Charles van Marrewijk, Harry Garretsen, and Steven Brakman 500
Diagnostic immunohistochemistry : theranostic and genomic applications 6th Edition 500
Chen Hansheng: China’s Last Romantic Revolutionary 500
热门求助领域 (近24小时)
化学 医学 生物 材料科学 工程类 有机化学 生物化学 物理 内科学 纳米技术 计算机科学 化学工程 复合材料 基因 遗传学 催化作用 物理化学 免疫学 量子力学 细胞生物学
热门帖子
关注 科研通微信公众号,转发送积分 3150617
求助须知:如何正确求助?哪些是违规求助? 2802025
关于积分的说明 7846089
捐赠科研通 2459372
什么是DOI,文献DOI怎么找? 1309219
科研通“疑难数据库(出版商)”最低求助积分说明 628708
版权声明 601757