Single‐step isolation of extracellular vesicles by size‐exclusion chromatography

小泡 纳米粒子跟踪分析 差速离心 大小排阻色谱法 色谱法 超离心机 离心 化学 血小板 生物化学 微泡 生物 小RNA 基因 免疫学
作者
Anita N. Böing,Edwin van der Pol,Anita E. Grootemaat,Frank A. W. Coumans,Auguste Sturk,Rienk Nieuwland
出处
期刊:Journal of extracellular vesicles [Taylor & Francis]
卷期号:3 (1) 被引量:979
标识
DOI:10.3402/jev.v3.23430
摘要

Background Isolation of extracellular vesicles from plasma is a challenge due to the presence of proteins and lipoproteins. Isolation of vesicles using differential centrifugation or density‐gradient ultracentrifugation results in co‐isolation of contaminants such as protein aggregates and incomplete separation of vesicles from lipoproteins, respectively. Aim To develop a single‐step protocol to isolate vesicles from human body fluids. Methods Platelet‐free supernatant, derived from platelet concentrates, was loaded on a sepharose CL‐2B column to perform size‐exclusion chromatography (SEC; n=3). Fractions were collected and analysed by nanoparticle tracking analysis, resistive pulse sensing, flow cytometry and transmission electron microscopy. The concentrations of high‐density lipoprotein cholesterol (HDL) and protein were measured in each fraction. Results Fractions 9–12 contained the highest concentrations of particles larger than 70 nm and platelet‐derived vesicles (46%±6 and 61%±2 of totals present in all collected fractions, respectively), but less than 5% of HDL and less than 1% of protein (4.8%±1 and 0.65%±0.3, respectively). HDL was present mainly in fractions 18–20 (32%±2 of total), and protein in fractions 19–21 (36%±2 of total). Compared to the starting material, recovery of platelet‐derived vesicles was 43%±23 in fractions 9–12, with an 8‐fold and 70‐fold enrichment compared to HDL and protein. Conclusions SEC efficiently isolates extracellular vesicles with a diameter larger than 70 nm from platelet‐free supernatant of platelet concentrates. Application SEC will improve studies on the dimensional, structural and functional properties of extracellular vesicles.
最长约 10秒,即可获得该文献文件

科研通智能强力驱动
Strongly Powered by AbleSci AI
更新
PDF的下载单位、IP信息已删除 (2025-6-4)

科研通是完全免费的文献互助平台,具备全网最快的应助速度,最高的求助完成率。 对每一个文献求助,科研通都将尽心尽力,给求助人一个满意的交代。
实时播报
orixero应助钱罐罐采纳,获得10
1秒前
doudou发布了新的文献求助30
2秒前
3秒前
7秒前
7秒前
高大的易蓉发布了新的文献求助100
8秒前
9秒前
情怀应助博士采纳,获得10
9秒前
小火苗发布了新的文献求助10
9秒前
14秒前
15秒前
HMethod完成签到 ,获得积分10
15秒前
15秒前
量子星尘发布了新的文献求助10
16秒前
16秒前
16秒前
山东及时雨完成签到,获得积分20
16秒前
18秒前
W查查完成签到,获得积分10
18秒前
yuk发布了新的文献求助30
19秒前
yyp发布了新的文献求助30
19秒前
19秒前
fyj发布了新的文献求助30
19秒前
端庄乐松完成签到,获得积分10
21秒前
星辰大海应助以筱采纳,获得10
22秒前
博士发布了新的文献求助10
22秒前
23秒前
23秒前
汉堡包应助科研通管家采纳,获得10
23秒前
共享精神应助科研通管家采纳,获得20
23秒前
Jasper应助小火苗采纳,获得50
23秒前
李健应助科研通管家采纳,获得10
23秒前
23秒前
斯文败类应助科研通管家采纳,获得10
23秒前
24秒前
知更鸟完成签到,获得积分10
24秒前
尤静柏完成签到,获得积分10
24秒前
隐形曼青应助Erika采纳,获得10
25秒前
25秒前
qu完成签到,获得积分10
25秒前
高分求助中
A new approach to the extrapolation of accelerated life test data 1000
Picture Books with Same-sex Parented Families: Unintentional Censorship 700
ACSM’s Guidelines for Exercise Testing and Prescription, 12th edition 500
Nucleophilic substitution in azasydnone-modified dinitroanisoles 500
不知道标题是什么 500
Indomethacinのヒトにおける経皮吸収 400
Effective Learning and Mental Wellbeing 400
热门求助领域 (近24小时)
化学 材料科学 医学 生物 工程类 有机化学 生物化学 物理 内科学 纳米技术 计算机科学 化学工程 复合材料 遗传学 基因 物理化学 催化作用 冶金 细胞生物学 免疫学
热门帖子
关注 科研通微信公众号,转发送积分 3976107
求助须知:如何正确求助?哪些是违规求助? 3520330
关于积分的说明 11202435
捐赠科研通 3256819
什么是DOI,文献DOI怎么找? 1798504
邀请新用户注册赠送积分活动 877642
科研通“疑难数据库(出版商)”最低求助积分说明 806496