A protocol describing the use of a recombinant protein-based, animal product-free medium (APEL) for human embryonic stem cell differentiation as spin embryoid bodies

胚状体 胚胎干细胞 重组DNA 细胞生物学 生物 干细胞 牛血清白蛋白 化学 细胞分化 生物化学 分子生物学 成体干细胞 基因
作者
Elizabeth S. Ng,Richard P. Davis,Edouard G. Stanley,Andrew G. Elefanty
出处
期刊:Nature Protocols [Springer Nature]
卷期号:3 (5): 768-776 被引量:309
标识
DOI:10.1038/nprot.2008.42
摘要

In order to promote the uniform and reproducible differentiation of human embryonic stem cells (HESCs) in response to exogenously added growth factors, we have developed a method (spin embryoid bodies (EBs)) that uses a recombinant protein-based, animal product-free medium in which HESCs are aggregated by centrifugation to form EBs. In this protocol we describe the formulation of this medium, denoted APEL (Albumin Polyvinylalcohol Essential Lipids), and its use in spin EB differentiation of HESCs. We also describe a more economical variant, BPEL (Bovine Serum Albumin (BSA) Polyvinylalchohol Essential Lipids), in which BSA replaces the recombinant human albumin. The integration of a medium that includes only defined and recombinant components with a defined number of cells to initiate EB formation results in a generally applicable, robust platform for growth factor-directed HESC differentiation.
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