Functional Roles of N-Terminal Domains in Pullulanase from Human Gut Lactobacillus acidophilus

普鲁兰酶 嗜酸乳杆菌 酶动力学 生物化学 化学 动力学 米氏-门汀动力学 生物 立体化学 酶分析 细菌 活动站点 物理 益生菌 量子力学 遗传学
作者
Yu Wang,Birte Svensson,Bernard Henrissat,Marie Sofie Møller
出处
期刊:Journal of Agricultural and Food Chemistry [American Chemical Society]
卷期号:71 (48): 18898-18908 被引量:2
标识
DOI:10.1021/acs.jafc.3c06487
摘要

Pullulanases are multidomain α-glucan debranching enzymes with one or more N-terminal domains (NTDs) including carbohydrate-binding modules (CBMs) and domains of unknown function (DUFs). To elucidate the roles of NTDs in Lactobacillus acidophilus NCFM pullulanase (LaPul), two truncated variants, Δ41-LaPul (lacking CBM41) and Δ(41+DUFs)-LaPul (lacking CBM41 and two DUFs), were produced recombinantly. LaPul recognized 1.3- and 2.2-fold more enzyme attack-sites on starch granules compared to Δ41-LaPul and Δ(41+DUFs)-LaPul, respectively, as measured by interfacial kinetics. Δ41-LaPul displayed markedly lower affinity for starch granules and β-cyclodextrin (10- and >21-fold, respectively) in comparison to LaPul, showing substrate binding mainly stems from CBM41. Δ(41+DUFs)-LaPul exhibited a 12 °C lower melting temperature than LaPul and Δ41-LaPul, indicating that the DUFs are critical for LaPul stability. Notably, Δ41-LaPul exhibited a 14-fold higher turnover number (kcat) and 9-fold higher Michaelis constant (KM) compared to LaPul, while Δ(41+DUFs)-LaPul's values were close to those of LaPul, possibly due to the exposure of aromatic by truncation.
最长约 10秒,即可获得该文献文件

科研通智能强力驱动
Strongly Powered by AbleSci AI
更新
大幅提高文件上传限制,最高150M (2024-4-1)

科研通是完全免费的文献互助平台,具备全网最快的应助速度,最高的求助完成率。 对每一个文献求助,科研通都将尽心尽力,给求助人一个满意的交代。
实时播报
研友_LOoomL发布了新的文献求助10
1秒前
1秒前
空岛与影应助啦嗖儿采纳,获得10
1秒前
笨笨歌曲完成签到,获得积分10
2秒前
汉堡包应助冲冲冲采纳,获得10
3秒前
寒冷的机器猫完成签到,获得积分10
3秒前
杜若发布了新的文献求助10
3秒前
4秒前
有为完成签到,获得积分10
4秒前
Lmm完成签到,获得积分0
5秒前
含蓄小兔子完成签到 ,获得积分10
5秒前
星辰大海应助liu采纳,获得10
6秒前
FashionBoy应助tomato采纳,获得10
6秒前
陈思完成签到,获得积分10
6秒前
7秒前
miko2138完成签到,获得积分10
7秒前
科研通AI2S应助顺利的半蕾采纳,获得10
8秒前
8秒前
derrrrrsin完成签到,获得积分10
8秒前
第三完成签到,获得积分10
9秒前
不配.应助奋斗的远锋采纳,获得10
9秒前
TTT发布了新的文献求助10
10秒前
11秒前
bujiachong发布了新的文献求助10
11秒前
杜若完成签到,获得积分20
12秒前
derrrrrsin发布了新的文献求助50
12秒前
12秒前
lalalatiancai发布了新的文献求助10
15秒前
zsy发布了新的文献求助10
16秒前
考拉完成签到,获得积分10
16秒前
16秒前
桐桐应助xiaobai采纳,获得30
17秒前
bai完成签到,获得积分10
17秒前
酷波er应助快点毕业吧采纳,获得10
18秒前
19秒前
崔梦楠完成签到,获得积分10
21秒前
祭天丶易木完成签到,获得积分10
21秒前
科目三应助忧虑的代芙采纳,获得10
21秒前
lllll完成签到,获得积分10
22秒前
buno应助kano采纳,获得10
23秒前
高分求助中
歯科矯正学 第7版(或第5版) 1004
Smart but Scattered: The Revolutionary Executive Skills Approach to Helping Kids Reach Their Potential (第二版) 1000
Semiconductor Process Reliability in Practice 720
PraxisRatgeber: Mantiden: Faszinierende Lauerjäger 700
GROUP-THEORY AND POLARIZATION ALGEBRA 500
Mesopotamian divination texts : conversing with the gods : sources from the first millennium BCE 500
Days of Transition. The Parsi Death Rituals(2011) 500
热门求助领域 (近24小时)
化学 医学 生物 材料科学 工程类 有机化学 生物化学 物理 内科学 纳米技术 计算机科学 化学工程 复合材料 基因 遗传学 催化作用 物理化学 免疫学 量子力学 细胞生物学
热门帖子
关注 科研通微信公众号,转发送积分 3228477
求助须知:如何正确求助?哪些是违规求助? 2876197
关于积分的说明 8194322
捐赠科研通 2543356
什么是DOI,文献DOI怎么找? 1373691
科研通“疑难数据库(出版商)”最低求助积分说明 646816
邀请新用户注册赠送积分活动 621402