Bioluminescent aptamer-based microassay for detection of melanoma inhibitory activity protein (MIA)

适体 生物发光 抑制性突触后电位 黑色素瘤 蛋白质检测 生物标志物 荧光素酶 化学 分子生物学 生物 生物化学 计算生物学 癌症研究 纳米技术 基因 材料科学 内分泌学 转染
作者
Eugenia E. Bashmakova,Alexander N. Kudryavtsev,Alexey E. Tupikin,Мarsel R. Kabilov,А. Е. Соколов,Ludmila A. Frank
出处
期刊:Analytical Methods [The Royal Society of Chemistry]
卷期号:16 (26): 4234-4239
标识
DOI:10.1039/d4ay00706a
摘要

Melanoma inhibitory activity protein (MIA) does obviously offer the potential to reveal clinical manifestations of melanoma. Despite a pressing need for effective diagnosis of this highly fatal disease, there are no clinically approved MIA detection ELISA kits available. A recommended MIA threshold has not yet been defined, mostly by reason of variability in immunoglobulins' affinity and stability, the difference in sample preparation and assay conditions. Here we present a pair of high-affinity DNA aptamers developed as an alternative recognition and binding element for MIA detection. Their stability and reproducible synthesis are expected to ensure this analysis under standard conditions. The devised aptamer-based solid-phase microassay of model standard and control human sera involves luciferase NLuc as a highly sensitive reporter. Bioluminescence dependence on MIA concentration ranges in a linear manner from 2.5 to 250 ng mL
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