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Three-step evolutionary enhanced capillary electrophoresis-SELEX for aptamer selection of exosome vesicles

适体 指数富集配体系统进化 外体 化学 毛细管电泳 微泡 小泡 计算生物学 生物化学 分子生物学 生物 小RNA 基因 色谱法 核糖核酸
作者
Liping Zhao,Ge Yang,Chao Zhu,Linsen Li,Yi Zhao,Yunxia Luan,Feng Qu
出处
期刊:Talanta [Elsevier]
卷期号:267: 125203-125203 被引量:10
标识
DOI:10.1016/j.talanta.2023.125203
摘要

As various disease biomarkers, drugs/biomolecules carriers and physiological function regulator, exosomes play significant roles in various physiological and pathological process. Thus, the purification and detection of some exosome are of great significance, which make it necessary for the development of the recognition elements. Aptamers with high affinity and specificity exhibited well in the above areas. In this work, a new three-step evolutionary enhanced strategy based on capillary electrophoresis (CE)-SELEX was proposed for effective aptamer selection of exosome vesicles for the first time. Natural killer cells (NK) exosome was used as the model target. And the aptamer could be obtained in five round CE selection within three steps evolution including precise nucleic acid sequence convergence (with NK exosome specific proteins as targets in round 1st and 3rd), affinity evolution (with NK exosome as target in round 2nd and 4th) and specific evolution (negative selection in round 5th). Arising from the compatibility of CE-SELEX for exosome vesicles aptamer selection, and the proposed strategy, aptamer against NK exosome had been selected with good affinity (KD value of 27.6 nM) and excellent specificity. The as proposed CE-SELEX strategy paves a novel way for recognition element selection of exosome vesicles.
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