Scanning Electron Microscopy (SEM) and Immuno-SEM of Nuclear Pore Complexes from Amphibian Oocytes, Mammalian Cell Cultures, Yeast, and Plants

免疫金标记 扫描电子显微镜 扫描共焦电子显微镜 扫描离子电导显微镜 显微镜 材料科学 环境扫描电子显微镜 超微结构 生物物理学 生物 植物 光学 复合材料 物理
作者
Martin W. Goldberg,Jindřiška Fišerová
出处
期刊:Methods in molecular biology 卷期号:: 417-437 被引量:2
标识
DOI:10.1007/978-1-0716-2337-4_27
摘要

Scanning electron microscopy (SEM)Scanning electron microscopy (SEM) can be used to image nuclear pore complex (NPC) surface structure Structures of from a number of organisms and model systems. With a field emission SEM Scanning electron microscopy (SEM) , this is a medium resolution technique where details of the organization of various components can be directly imaged. Some components, such as the NPC baskets and cytoplasmic filaments, are difficult to visualize in any other way. Protein components can be identified by immunogold labeling. Any surface that can be exposed can potentially be studied by SEM Scanning electron microscopy (SEM) . Several overlapping protocols for SEM Scanning electron microscopy (SEM) sample preparation and immunogold labeling of NPCs are given here. Various parameters for sample preparation, fixation, immunogold labeling, drying, metal coating, and imagingImaging are detailed which have been optimized for different types of specimens and desired endpoints.
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