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Laser Microdissection of Cells and Isolation of High-Quality RNA After Cryosectioning

激光捕获显微切割 生物 核糖核酸 线虫 显微解剖 细胞生物学 根结线虫 微阵列 RNA提取 基因表达 基因 分子生物学 遗传学 生态学
作者
Marta Barcala,Carmen Fenoll,Carolina Escobar
出处
期刊:Methods in molecular biology 卷期号:: 87-95 被引量:16
标识
DOI:10.1007/978-1-61779-839-9_6
摘要

Laser capture microdissection (LCM) has become a powerful technique that allows analyzing gene expression in specific target cells from complex tissues. It is widely used in animal research, yet few studies on plants have been carried out. We have applied this technique to the plants–nematode interaction by isolating feeding cells (giant cells; GCs) immersed inside complex swelled root structures (galls) induced by root-knot nematodes. For this purpose, a protocol that combines good morphology preservation with RNA integrity maintenance was developed, and successfully applied to Arabidopsis and tomato galls. Specifically, early developing GCs at 3 and 7 days post infection (dpi) were analyzed; RNA from LCM GCs was amplified and used successfully for microarray assays.
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