A fast and cheap in-house magnetic bead RNA extraction method for COVID-19 diagnosis

RNA提取 核糖核酸 生物 萃取(化学) 2019年冠状病毒病(COVID-19) 病毒学 核酸 逆转录聚合酶链式反应 实时聚合酶链反应 金标准(测试) 严重急性呼吸综合征冠状病毒2型(SARS-CoV-2) 色谱法 医学 信使核糖核酸 基因 内科学 化学 传染病(医学专业) 生物化学 疾病
作者
Fábio Sossai Possebon,Leila Sabrina Ullmann,Camila Dantas Malossi,Gabrielle Thaís Miodutzki,Evelyn Cristine da Silva,Eduardo Ferreira‐Machado,Iolanda Simões Braga,Isadora Fernanda Pelaquim,João Pessoa Araújo
出处
期刊:Journal of Virological Methods [Elsevier]
卷期号:300: 114414-114414 被引量:8
标识
DOI:10.1016/j.jviromet.2021.114414
摘要

COVID-19 has posed a worldwide public health challenge affecting millions of people in different countries. Rapid and efficient detection of SARS-CoV-2 is essential for pandemic control. Reverse Transcription quantitative PCR (RT-qPCR) of nasopharyngeal swabs is the gold standard method for the virus detection, but the high demand for tests has substantially increased the costs and reduced the availability of reagents, including genetic material purification kits. Thus, the present study aimed to compare two bead-based RNA extraction methods (an in-house and a commercial kit) from nasopharyngeal swabs and RT-qPCR detection of SARS-CoV-2. Twenty-five positive and five negative nasopharyngeal swab samples were subjected to extraction of nucleic acids using both methods in an automated platform. Both protocols revealed a high correlation between Cycle Quantifications (Cqs) (r = 0.99, p < 0.0001). In addition, the in-house kit was 89.5 % cheaper when compared to the mean cost of commercial RNA extraction kits. The results show that the in-house protocol is an affordable and reliable option for RNA extraction for SARS-CoV-2 detection from nasopharyngeal swabs.
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