Glass beads load macromolecules into living cells

有孔小珠 高分子 右旋糖酐 单层 材料科学 生物物理学 细胞 人口 生物 复合材料 纳米技术 生物化学 社会学 人口学
作者
Paul L. McNeil,E. Warder
出处
期刊:Journal of Cell Science [The Company of Biologists]
卷期号:88 (5): 669-678 被引量:166
标识
DOI:10.1242/jcs.88.5.669
摘要

ABSTRACT We describe and characterize an exceptionally rapid and simple new technique for loading large numbers of cultured cells with large macromolecules. The culture medium of the cell monolayer is replaced by a small volume of the macromolecule to be loaded. Glass beads (75-500 μm diameter) are then sprinkled onto the cells, the cells are washed free of beads and exogenous macromolecules, and ‘bead-loading’ is completed. The conditions for bead-loading can readily be modified to accommodate cell type and loading objectives: for example, the amount of loading per cell increases if bead size is increased or if beads are agitated after sprinkling onto the monolayer, but at the expense of increased cell loss. As many as 97% of a population of bovine aortic endothelial (BAE) cells were loaded with a 10000Mr dextran; and 79% with a 150 000Mr dextran using beadloading. Various cell lines have been loaded using glass beads. Moreover, bead-loading has the advantage of producing loaded cells that remain adherent and well-spread, thus minimizing recovery time and permitting immediate microscopic examination.

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