Development and evaluation of a novel loop mediated isothermal amplification coupled with TaqMan probe assay for detection of genetically modified organism with NOS terminator

塔克曼 环介导等温扩增 分子生物学 终端(太阳能) 生物 实时聚合酶链反应 转基因生物 DNA 基因 遗传学 物理 电离层 天文
作者
Yanbo Yu,Rui Li,Zonghua Ma,Han Mei-hong,Sen Zhang,Minghui Zhang,Youwen Qiu
出处
期刊:Food Chemistry [Elsevier]
卷期号:356: 129684-129684 被引量:20
标识
DOI:10.1016/j.foodchem.2021.129684
摘要

In this study, we aim to develop a novel loop mediated isothermal amplification (LAMP) coupled with TaqMan (LAMP-TaqMan) method for quick qualitative detection of genetically modified organism (GMOs). We designed four LAMP primers and one TaqMan probe for the LAMP-TaqMan detection method to detect the nopaline synthase gene (NOS) terminator in GMOs. This assay enabled the amplification of DNA within ~20 min at a constant temperature of 65 °C. This assay detected as few as five copies of target sequences, which had a high specificity similar to the TaqMan qPCR method. Furthermore, the LAMP-TaqMan detection method was successfully used to amplify and detect DNA from food samples of the major crops (soybean, maize, rice, etc.). In summary, a novel LAMP-TaqMan assay has been developed, which has the similar sensitivity but takes less time than the TaqMan qPCR method. This method offers a novel approach for rapid detection of GMOs in foods.
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